Human Irisin ELISA TEST KIT

BEDOELD GEBRUIK

Deze kit maakt de bepaling van Irisin-concentraties in humaan serum, plasma en andere biologische vloeistoffen mogelijk

Assay procedure

1. Monster verdunnen en toevoegen: Verdun de standaard met originele dichtheid volgens onderstaande tabel:

2. monster toevoegen: Zet blanco wells apart (blanco vergelijkingswells voegen geen monster en HRP-Conjugate reagens toe, andere stappen zijn hetzelfde). testmonster well. Voeg 50μl standaard toe aan Microelisa stripplate, voeg 40μl monsterverdunning toe aan de testmonster well, voeg vervolgens 10μl testmonster toe (de uiteindelijke verdunning van het monster is 5-voudig), voeg monster toe aan wells, raak de wellwand zo min mogelijk aan en meng voorzichtig.

3. Incuberen: Na het sluiten van de plaat met een sluitmembraan, 30 minuten incuberen bij 37℃.

4. Vloeistof configureren: 30-voudige (of 20-voudige) wasoplossing 30-voudig (of 20-voudig) verdunnen met gedestilleerd water en bewaren.

5. Wassen: Open het sluitmembraan, gooi de vloeistof weg, droog door te zwaaien, voeg wasbuffer toe aan elke well, laat 30 seconden staan en laat dan leeglopen, herhaal 5 keer, droog door te deppen.

6. Enzym toevoegen: Voeg HRP-Conjugate reagens 50μl toe aan elke well, behalve de blanco well.

7. Incuberen: Handelen zoals bij 3.

8. Wassen: Handelen zoals bij 5.

9. Kleuren: Voeg Chromogeen Oplossing A 50ul en Chromogeen Oplossing B 50ul toe aan elke well, vermijd lichtbehoud gedurende 10 minuten bij 37℃

10. Stop de reactie: Voeg Stop Oplossing 50μl toe aan elke well, Stop de reactie (de blauwe kleur verandert in gele kleur).

11. assay: neem blanco well als nul, Lees de absorptie af bij 450 nm na het toevoegen van Stop Oplossing en binnen 15 minuten.

Specimenvereisten

1. Extraheer zo snel mogelijk na monsterafname en volgens de relevante literatuur, en moet zo snel mogelijk na de extractie worden uitgevoerd. Indien dit niet mogelijk is, kan het specimen worden bewaard bij -20 ℃ om te bewaren, vermijd herhaalde vries-dooicycli.

2, Kan het monster dat NaN3 bevat niet detecteren, omdat NaN3 de HRP-activiteit remt.

3. Extraheer zo snel mogelijk na monsterafname en volgens de relevante literatuur, en moet zo snel mogelijk na de extractie worden uitgevoerd. Indien dit niet mogelijk is, kan het specimen worden bewaard bij -20 ℃ om te bewaren, vermijd herhaalde vries-dooicycli.

4. Kan het monster dat NaN3 bevat niet detecteren, omdat NaN3 de HRP-activiteit remt.

Belangrijke opmerkingen

• De kit moet uit de koelomgeving worden gehaald en 15-30 minuten op kamertemperatuur worden gebracht. ELISA-platen die zijn gecoat en na opening niet zijn gebruikt, moeten in een verzegelde zak worden bewaard.
• De wasbuffer zal kristalliseren en scheiden, deze kan worden verwarmd in het water om te helpen oplossen bij verdunning. Wassen heeft geen invloed op het resultaat.
• Voeg monster toe met een sampler bij elke stap en controleer regelmatig de nauwkeurigheid, vermijd experimentele fouten. Voeg monster binnen 5 minuten toe, als het aantal monsters groot is, wordt aanbevolen om Volley te gebruiken.
• Als de inhoud van het testmateriaal te hoog is (de monster-OD is groter dan de eerste standaard well), verdun dan het monster (n-voudig), verdun en vermenigvuldig met de verdunningsfactor. (×n×5).
• Het sluitmembraan is alleen voor eenmalig gebruik, om kruisbesmetting te voorkomen.
• De substraat vermijdt lichtbehoud.
• Volg de gebruiksaanwijzing strikt op, de bepaling van het testresultaat moet de microtiterplaatlezer als standaard nemen.
• Alle monsters, wasbuffer en elk soort afval moeten worden verwerkt volgens infectieus materiaal.
• Meng geen reagentia met die van andere partijen.