Rattentumornecrosefactor Alpha Elisa Kit

Rat Tumor necrosis factor α,Cachectin,TNF,TNFSF2,TNF-α ELISA KIT

Rat Tumor Necrosis Factor Alpha Elisa Kit Voor Tnf Alpha 48 Wells

Materialen meegeleverd met de kit

Principe

Deze ELISA-kit gebruikt Sandwich-ELISA als methode. De Microelisa stripplaat die in deze kit wordt geleverd, is voorgecoat met een antilichaam dat specifiek is voor TNF-α . Standaarden of monsters worden toegevoegd aan de juiste Microelisa stripplaatwells en gecombineerd met het specifieke antilichaam. Vervolgens wordt een met mierikswortelperoxidase (HRP) geconjugeerd antilichaam dat specifiek is voor TNF-α aan elke Microelisa stripplaatwell toegevoegd en geïncubeerd. Vrije componenten worden weggewassen. De TMB-substraatoplossing wordt aan elke well toegevoegd. Alleen die wells die TNF-α en HRP-geconjugeerd trombomoduline-antilichaam bevatten, zullen blauw van kleur worden en vervolgens geel worden na toevoeging van de stopoplossing. De optische dichtheid (OD) wordt spectrofotometrisch gemeten bij een golflengte van 450 nm. De OD-waarde is evenredig met de concentratie van TNF-α. U kunt de concentratie van TNF-α in de monsters berekenen door de OD van de monsters te vergelijken met de standaardcurve.

Opmerkingen:

• Bewaar de kit bij 4°C na ontvangst. De kit moet vóór de test op kamertemperatuur worden gebracht. Verwijder onnodige strips van de TNF-α antilichaam-gecoate plaat, verzegel ze opnieuw in een zip-lock folie en bewaar ze bij 4°C.
• Er kunnen neerslagen verschijnen in geconcentreerde wasbuffer. Verwarm de buffer om alle neerslagen op te lossen, wat de resultaten niet beïnvloedt.
• Er moet een nauwkeurige pipet worden gebruikt om experimentele fouten te voorkomen. Monsters moeten in minder dan 5 minuten aan de Microplaat worden toegevoegd. Als een groot aantal monsters is opgenomen, wordt een pipet met meerdere kanalen aanbevolen.
• Er moet in elke test een standaardcurve worden opgenomen. Duplicaatwells worden aanbevolen. Als de OD-waarde van het monster groter is dan de eerste well van de standaarden, verdun het monster dan (n keer) vóór de test. Vermenigvuldig bij het berekenen van de oorspronkelijke trombomodulineconcentratie de totale verdunningsfactor (XnX5).
• Om kruisbesmetting te voorkomen, zijn Microplaatverzegelaars slechts voor eenmalig gebruik.
• Houd de substraat uit de buurt van licht.
• Alle handelingen moeten strikt in overeenstemming zijn met de instructies van de fabrikant. De resultaten worden bepaald door de Microtiterplaatlezer.
• Alle monsters, wasbuffer en afvalstoffen moeten worden behandeld als infectieuze agentia.
• Reagentia uit verschillende batches mogen niet worden gemengd.

Bekende concentraties van TNF-a Standaard en de bijbehorende OD-waarde worden respectievelijk op de logschaal (x-as) en de logschaal (y-as) uitgezet. De concentratie van TNF-a in het monster wordt bepaald door de OD van het monster op de Y-as uit te zetten. De oorspronkelijke concentratie wordt berekend door de verdunningsfactor te vermenigvuldigen.