Human TLR4 RUO ELISA Assay Kit Voor medische diagnose RUO Alleen voor onderzoek

Doel:

Deze set maakt het mogelijk om de concentraties van TLR4 in het menselijk serum te bepalen.

Beginsel van de test

Het kit meet het niveau van menselijk TLR4 in het monster, gebruikt het gezuiverde menselijk TLR4 antilichaam om de microtiterplaatputten te bedekken, maakt een antilichaam in vaste fase en voegt vervolgens TLR4 toe aan de putten,Gecombineerd TLR4-antilichaam dat met HRP gemarkeerd is, wordt antilichaam-antigeen-enzym-antilichaamcomplex, na wassen Volledig, voeg TMB-substraatoplossing toe, TMB-substraat krijgt een blauwe kleur Bij HRP enzymgekatalyseerd,De reactie wordt beëindigd door toevoeging van een oplossing van zwavelzuur en de kleurverandering wordt spectrophotometrisch gemeten op een golflengte van 450 nmDe concentratie van menselijk TLR4 in de monsters wordt vervolgens bepaald door de O.D. van de monsters met de standaardcurve te vergelijken.

Technische parameters:

Materiaal dat bij de kit wordt geleverd:

Vaststelling van het monster

• De proefpersonen moeten zo spoedig mogelijk na het verzamelen van het exemplaar en volgens de relevante literatuur worden geëxperimenteerd en zo spoedig mogelijk na de extractie worden geëxperimenteerd.het monster kan bij -20 °C worden bewaard omVermijd herhaalde bevriezing-ontdooiing cycli.
• Kan het monster dat NaN3 bevat niet detecteren, omdat NaN3 HRP-actief remt.

Beoordelingsprocedure

• Verdunning en toevoeging van het monster: Verdunning Oorspronkelijke dichtheid Standard als in de volgende tabel:

2. Proef toevoegen:Blankputten apart plaatsen (blank vergelijkingsputten voegen geen monster en HRP-Conjugate reagens toe, anders is elke stap dezelfde operatie).Voeg 50 μl standaard toe aan Microelisa stripplate, voeg proefverdunning 40μl toe aan het proefputje, voeg vervolgens proefproef 10μl toe (de eindverdunning van het proefputje is 5 maal), voeg proefput in de putten, raak de putwand zo veel mogelijk niet aan en meng voorzichtig.

3Incuberen: Na het sluiten van de plaat met het sluitingsplaat membraan, incuberen gedurende 30 min bij 37°C.

4. Configureer vloeistof: 30-voudig (of 20-voudig) wasoplossing, 30voudig (of 20-voudig) verdund met gedistilleerd water en reserve.

5. Wassen: Ontdek sluitplaat membraan, gooi vloeistof, droog door swing, voeg wasbuffer aan elke put, nog steeds voor 30s dan afvoeren, herhalen 5 keer, droog door kloppen.

6.Enzym toevoegen: 50 μl HRP-Conjugate reagens toevoegen aan elke put, behalve een lege put.

7Incubatie: operatie met 3.

8Wassen: operatie met 5.

9.Kleur: voeg chromogeenoplossing A 50ul en chromogeenoplossing B 50ul toe aan elk putje, laat lichtbehoud gedurende 10 minuten bij 37°C

10Stop de reactie: Voeg Stop Solution50μl toe aan elke put, Stop de reactie ((de blauwe kleur verandert in gele kleur).

11.Test: neem een lege put als nul, lees de absorptie bij 450 nm na het toevoegen van stopoplossing en binnen 15 min.

Bereken

Neem de standaarddichtheid voor de horizontale, de OD-waarde voor de verticale, teken de standaardcurve op grafiekpapier,Zoek de overeenkomstige dichtheid volgens de OD-waarde van de steekproef door de steekproefcurve, vermenigvuldigd met het verdunningsmultipel, of de rechte regressievergelijking van de standaardcurve met de standaarddichtheid en de OD-waarde berekenen, met de steekproefwaarde van de OD-waarde in de vergelijking,berekenen van de monsterdichtheid, vermenigvuldigd met de verdunningsfactor, is het resultaat de werkelijke dichtheid van het monster.