Menselijke Thrombomodulin TM Fetomodulin CD141 THBD THRM ELISA Kit

Menselijke thrombomodulin, TM, Fetomodulin, CD141, THBD, THRM ELISA Kit For Research Use

Menselijke thrombomodulin, TM, Fetomodulin, CD141, THBD, THRM ELISA Kit

Materialen van de uitrusting worden voorzien die

Principe

Deze ELISA-uitrusting gebruikt sandwich-ELISA als methode. Microelisa stripplate in deze uitrusting wordt verstrekt pre-coated met een antilichaam specifiek voor thrombomodulin die. De normen of de steekproeven worden toegevoegd aan de aangewezen putten van Microelisa stripplate en aan het specifieke antilichaam gecombineerd. Dan een Mierikswortelperoxidase (HRP) - het vervoegde antilichaam specifiek voor thrombomodulin wordt toegevoegd aan elke Microelisa stripplate goed en uitgebroed. De vrije componenten worden gereinigd. De TMB-substraatoplossing wordt goed toegevoegd aan elk. Slechts zullen die putten die thrombomodulin en HRP vervoegd thrombomodulinantilichaam bevatten blauw in kleur lijken en zullen dan geel na de toevoeging van de eindeoplossing worden. De optische dichtheid (OD) wordt gemeten spectrofotometrisch bij een golflengte van 450 NM. De OD waarde is evenredig aan de concentratie van thrombomodulin. U kunt de concentratie van thrombomodulin in de steekproeven berekenen door OD van de steekproeven bij de standaardkromme te vergelijken.

Steekproefvoorbereiding

1. Serumvoorbereiding

Na inzameling van het gehele bloed, sta het bloed toe om te klonteren door het bij kamertemperatuur ongestoord te verlaten. Dit vergt gewoonlijk 10-20 minuten. Verwijder de klonter door bij 2,000-3,000 t/min 20 minuten te centrifugeren. Als de precipitaten tijdens reserve verschijnen, zou de steekproef moeten zijn opnieuw centrifugated.

2. Plasmavoorbereiding

Verzamel het gehele bloed in buizen met antistollingsmiddel (EDTA of citraat). Na uitgebroed bij kamertemperatuur 10-20 minuten, zijn de buizen centrifugated voor 20 min bij 2,000-3,000 t/min. Verzamel zorgvuldig de bovendrijvende substantie als plasmasteekproeven. Als de precipitaten tijdens reserve verschijnen, zou de steekproef moeten zijn opnieuw centrifugated.

3. Urinesteekproeven

Verzamel urine in aseptische buizen. Verzamel zorgvuldig de bovendrijvende substantie na het centrifugeren voor 20 min bij 2,000-3,000 t/min. Als de precipitaten tijdens reserve verschijnen, zou de steekproef moeten zijn opnieuw centrifugated. De voorbereidingsprocedure van cerebro-spinale vloeibare en pleuroperitoneal vloeistof is hetzelfde als dat van urinesteekproef.

4. Celsteekproeven

Als u de afscheidingen van cellen wilt ontdekken, verzamel cultuurbovendrijvende substantie in aseptische buizen. Verzamel zorgvuldig de bovendrijvende substantie na het centrifugeren voor 20 min bij 2,000-3,000 t/min. Als u intracellular componenten wilt ontdekken, verdun de cellen aan 1X106/ml met PBS (pH 7.2-7.4). De cellen werden vernietigd om intracellular componenten vrij te geven door herhaalde te bevriezen en te ontdooien. Verzamel zorgvuldig de bovendrijvende substantie na het centrifugeren voor 20 min bij 2,000-3,000 t/min. Als de precipitaten tijdens reserve verschijnen, zou de steekproef moeten zijn opnieuw centrifugated.

5. Weefselsteekproeven

De weefselsteekproeven worden gesneden, gewogen, in vloeibare stikstof bevroren en bij -80℃ voor toekomstig gebruik opgeslagen. De weefselsteekproeven werden gehomogeniseerd na het toevoegen van PBS (pH 7,4). De steekproeven zouden bij 4℃ moeten worden in werking gesteld. Verzamel zorgvuldig de bovendrijvende substantie na het centrifugeren voor 20 min bij 2,000-3,000 t/min. Gedeelte de bovendrijvende substantie voor ELISA-analyse en toekomstig gebruik.

Nota's:

• De steekproefextractie en ELISA-de analyse zouden zo spoedig mogelijk na steekproefinzameling moeten worden uitgevoerd. De steekproeven zouden volgens de relevante literatuur moeten worden gehaald. Als ELISA-de analyse niet kan onmiddellijk worden uitgevoerd, kunnen de steekproeven bij -20℃.Repeated worden opgeslagen freeze-thaw cycli zouden moeten worden vermeden.
• Onze uitrustingen kunnen niet voor steekproeven met NaN3 worden gebruikt die de activiteit van HRP kan remmen.