Alleen voor in vitro diagnostisch en professioneel gebruik.
Naam
Anti-Ct IgG ELISA Test Kit (Serum/Plasma)
BEOOGD GEBRUIK
Deze kit is een kwalitatieve detectie van Chlamydia trachomatis (Ct) IgG in menselijk serum/plasma. De kit is
geschikt voor klinische screening en diagnose van Ct-infectie in serum/plasma.
TEST PRINCIPE
Ct-antigeen wordt geabsorbeerd in de vaste fase op de polystyreen reactiemicroplaat. Indien er Ct IgG-antilichaam
aanwezig is in het testmonster, bindt het aan het Ct-antigeen dat op de microplaat is gecoat, vormt een antigeen-antilichaamcomplex, en bindt vervolgens
aan het enzym-gelabelde anti-antilichaam en vormt een antigeen-antilichaam-antilichaamcomplex op het oppervlak
van de microplaat, en vertoont een blauwe kleur in de corresponderende putjes door de werking van het substraat. Daarom kan het
specifiek het Ct IgG in menselijk serum/plasma detecteren.
TEST PROCEDURE
1. Breng alle reagentia 15 minuten voor gebruik op kamertemperatuur.
2. Verdun de wasbuffer met een verhouding van 1:40 met gedestilleerd water voor gebruik.
3. Voeg 100μL monsterverdunner toe in de corresponderende putjes (Niet toevoegen in de blanco putjes, negatieve
controleputjes en positieve controleputjes). Het monster moet overeenkomen met het aantal microplaten.
elke plaat moet worden voorzien van 2 negatieve controleputjes, 1 positieve controleputje en 1 blanco
controleputje. Voeg 5μL monster toe in de corresponderende putjes, meng grondig met de pipet, voeg
50μL negatieve controle en positieve controle toe aan de negatieve controleputjes en het positieve controleputje (Niet
toevoegen in de blanco putjes).
Opmerking: Gebruik een aparte wegwerppipetpunt voor elk specimen, negatieve en positieve controle om
kruisbesmetting te voorkomen.
4. Schud voorzichtig om 30 seconden te mengen. Incubeer gedurende 20 minuten bij 37°C met de afdichtingsplaatmembraan
die de plaat afdicht.
5. Verwijder en gooi het plaatdeksel aan het einde van de incubatie weg. Haal eruit, voeg wasbuffer toe aan
elk putje gedurende 20 seconden. Herhaal 5 keer. Na de laatste wascyclus, draai de plaat om op
absorberend papier of een schone handdoek, en tik erop om eventuele resten te verwijderen.
6. Voeg respectievelijk 50µL enzymconjugaat toe (Niet toevoegen in de blanco putjes)
7. Incubeer gedurende 20 minuten bij 37°C met de afdichtingsplaatmembraan die de plaat afdicht. Herhaal de
wasstap 5 keer zoals in stap 5.
8. Voeg 50µL Substraat A en 50µL Substraat B toe (Niet toevoegen in de blanco putjes). Incubeer gedurende 37°C gedurende
10 minuten met de afdichtingsplaatmembraan die de plaat afdicht.
9. Voeg 50μL stopoplossing toe aan elk putje (Niet toevoegen in de blanco putjes). Meng voorzichtig door te schudden, lees de
absorptie binnen 10 minuten na het stoppen van de reactie. Kalibreer de plaatlezer met de blanco
putjes en lees de absorptie af bij 450 nm. Indien een dual-filterinstrument wordt gebruikt, stel de referentiegolflengte in op 630 nm. Stel geen blanco putje in indien duale golflengte wordt gebruikt om te detecteren. Bereken de
afsnijdingswaarde en evalueer de resultaten.
INTERPRETATIE VAN RESULTATEN
Chronometrie: Lees de optische dichtheid (OD) van het monster af bij 450 nm met een microplaatlezer.
De gemiddelde OD-waarde van de negatieve controle ≤ 0,1 en de gemiddelde OD-waarde van de positieve controle ≥ 0,8, de test is geldig,
anders is de test ongeldig.
Afsnijdingswaarde (C.O.) = De gemiddelde OD-waarde van de negatieve controle x 3 (Berekend als 0,10 wanneer de gemiddelde
OD-waarde van de negatieve controle
< 0,10, berekend op basis van de werkelijke waarde wanneer de gemiddelde OD-waarde van de negatieve controlewaarde > 0,10 is)
Positieve resultaten: Monster OD-waarde ≥ C.O.