1.Bereken het gewenste aantal microwells. Verwijder de resterende microwells en plaats ze met desiccant in de
hersluitbare plastic zak, sluit deze af en bewaar op 2-8°C voor later gebruik.
2.Voeg Calibrators en Monsters toe:
2. 1 Blanke well: Voeg geen reagentia toe.
2. 2 Calibrator wells: Voeg 100 µL Calibrators toe aan de aangewezen controlewells.
2.3 Testwells: Voeg 100 µL Monsterverdunner toe aan de testwells, voeg vervolgens 10 µL monster toe in de corresponderende well.
2.4 Schud de plaat voorzichtig gedurende 20 seconden en bedek de plaat vervolgens met de sealer.
3.Incubeer: Incubeer de plaat gedurende 30 minuten bij 37°C.
4.Wasstap (Kan handmatig of met een geautomatiseerde wasmachine worden uitgevoerd):
Handmatig wassen: Verwijder voorzichtig het incubatiemengsel door de oplossing in een afvalcontainer te deponeren. Vul elke
well met 350 µL verdunde wasbuffer en schud voorzichtig gedurende 20-30 seconden. Gooi de wasoplossing volledig weg. Herhaal nog 4
keer. Na voltooiing van de laatste wasstap, tik de plaat op absorberend papier om resterend vocht te verwijderen.
Geautomatiseerd wassen: Een automatische plaatwasser moet worden gekalibreerd om efficiënt wassen te garanderen. Vul elke well met 350 µL
verdunde wasbuffer en laat 20-30 seconden weken. Zuig alle wells volledig af. Herhaal nog 4 keer.
5.Conjugaat: Voeg 100 µL conjugaat toe aan elke well, behalve de Blanke Well.
6.Incubeer: Bedek de wells en incubeer gedurende 30 minuten bij 37°C.
7.Wasstap: Was de plaat 5 keer zoals beschreven in stap 4.
8.Substraat: Voeg 50 µL Substraat A en 50 µL Substraat B toe aan elke well, inclusief de Blanke Well. Schud de
microwells gedurende 20 seconden. Incubeer gedurende 15 minuten bij 37°C in het donker.
9.Stopoplossing: Voeg 50 µL Stopoplossing toe aan elke well. Er moet een gele kleur ontstaan in wells die Positieve specimens bevatten.
10.Resultaten aflezen: Aflezen bij 450/630-700 nm binnen 30 minuten.
1. Opmerking: Microplaat kan ook worden afgelezen bij 450 nm, maar het wordt sterk aanbevolen om deze af te lezen bij 450/630-700 nm voor
betere resultaten.