AHM ELISA TEST KIT

1. Principe

De AMH ELISA is een kwantitatieve immunoassay die Anti-Müllerian Hormoon (AMH) meet in menselijk serum of plasma. Het maakt gebruik van een sandwich ELISA (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) formaat met antilichamen die specifiek zijn voor AMH, waardoor een precieze detectie van biomarkers van de ovariële reserve mogelijk is.

2. Beoogd gebruik

• Beoordeling van de ovariële reserve (vruchtbaarheidspotentieel bij vrouwen).

• Diagnose van polycysteus ovariumsyndroom (PCOS).

• Monitoring van geassisteerde reproductieve technologie (ART) (bijv. IVF).

• Pediatrische en menopauze-gerelateerde hormoonstudies.

3. Belangrijkste kenmerken

• Hoge gevoeligheid: Detecteert lage AMH-niveaus (typisch bereik: 0.01–24 ng/mL).

• Hoge specificiteit: Minimale kruisreactiviteit met gerelateerde hormonen (bijv. inhibine B).

• Formaat: 96-wells microplaat (competitieve of sandwich ELISA, afhankelijk van de kit).

• Monstertypes: Serum (gouden standaard) of plasma (EDTA/heparine).

• Monstervolume: 20–50 µL per test.

4. Assayprocedure

1. Monsterbereiding: Bloedmonsters centrifugeren (10 min bij 1000–3000 × *g*).

2. Incubatie:

   • Voeg monsters/standaarden toe aan antilichaam-gecoate wells.

   • Incubeer (1–2 uur, RT of 37°C).

3. Wassen: Verwijder ongebonden materiaal.

4. Detectie: Voeg enzym-geconjugeerd antilichaam (bijv. HRP) toe → substraat (TMB).

5. Stopoplossing: Zure oplossing stopt de reactie (kleurverandering).

6. Uitlezing: Meet absorptie bij 450 nm (referentie: 620–650 nm).

5. Prestatiegegevens

• Nauwkeurigheid: Herstelsnelheid 90–110% (vs. WHO/NIBSC-standaarden).

• Precisie: Intra-assay CV <10%, inter-assay CV <12%.

• Lineariteit: Verdunningsherstel 85–115%.

• Detectielimiet (LOD): 0.01–0.1 ng/mL (kit-afhankelijk).

6. Interpretatie

• Normaal bereik:

  • Premenopauzale vrouwen: 1.0–4.0 ng/mL.

  • Lage ovariële reserve: <1.0 ng/mL.

  • PCOS: Vaak >4.0 ng/mL.

• Geslacht/leeftijd-specifieke afkappunten moeten per laboratorium worden gevalideerd.

7. Voordelen

• Stabiliteit: AMH is robuust (monster stabiel gedurende 48–72 uur bij 2–8°C; lange termijn bij –20°C).

• Automatisering-compatibel: Aanpasbaar aan platforms zoals DS2 (Dynex) of ELx808 (BioTek).

8. Beperkingen

• Niet gestandaardiseerd over kits: Resultaten kunnen variëren tussen fabrikanten.

• Interferenties: Hemolyse, lipemie of herhaalde vries-dooicycli.

9. Voorbeelden van commerciële kits

• "AMH Gen II ELISA" (Ansh Labs/Abbott).

• "picoAMH ELISA" (Ansh Labs, ultra-gevoelig).

• "Human AMH ELISA Kit" (R&D Systems, Cat. Nr. DSL-10-14400).