Het denguevirus is een flavivirus dat voornamelijk voorkomt in tropische en subtropische gebieden.
De virussen zijn verwant aan serotypen van denguevirussen, en de overdracht vindt plaats via muggen, voornamelijk Aedes aegypti en Aedes albopictus.
De door muggen overgedragen denguevirussen (serotype 1-4) veroorzaken dengue-koorts, een ernstige griepachtige ziekte.
In de derde wereld zijn er een groot aantal landen met een hoog gehalte aan ziekteverwekkende stoffen, met name in de tropische regio's van de derde wereld en met een uitbreiding naar subtropische ontwikkelde landen, waaronder de Verenigde Staten.
dat er elk jaar wereldwijd 50-80 miljoen gevallen van dengue koorts voorkomen, waaronder een dodelijke vorm van de ziekte die
De eerste infectie met het denguevirus resulteert in een zelfmoord.
beperkende ziekte gekenmerkt door milde tot hoge koorts van 3 tot 7 dagen, ernstige hoofdpijn met pijn achter de ogen, spierpijn
In veel delen van het zuidoosten van Europa is secundaire infectie de meest voorkomende vorm van de ziekte.
Deze vorm van ziekte is ernstiger en kan leiden tot DHF en DSS.
Deze ziekte kan hoge koorts, bloedarmoede en bloedsomloopfalen met zich meebrengen en het sterftecijfer kan zo hoog zijn als 40%.
De diagnose van DSS is bijzonder belangrijk, aangezien patiënten binnen 12 tot 24 uur kunnen overlijden als er geen geschikte behandeling wordt gegeven.
toegediend.
Primaire denguevirusinfectie wordt gekenmerkt door verhogingen van de specifieke NS1-antigeenwaarden 0 tot 9 dagen na het begin van de ziekte.
Een vroegere diagnose van dengue vermindert het risico op complicaties zoals DHF of DSS.
vooral in landen waar dengue endemisch is.
Testprocedure
1Alle reagentia moeten 15 minuten voor gebruik op kamertemperatuur worden gelaten.
2. Verdun de wasbuffer met gedistilleerd water met een verdunningsfrequentie van 1:40 voor gebruik.
3. Voeg 100μL Probeverdunner toe in de overeenkomstige put, voeg 10μL monster toe in de overeenkomstige put (niet toevoegen in de lege put).Voeg 100μL positieve en negatieve controle toe aan de positieve en negatieve controleputHet monster dient overeen te komen met het aantal microplaten, elk plaatstuk dient voorzien te zijn van 2 bronnen voor negatieve controle, 1 bron voor positieve controle en 1 bron voor lege controle.
Opmerking: Gebruik voor elk monster, negatieve en positieve controle, een afzonderlijke pipetspits om kruisbesmetting te voorkomen.
4Schudt voorzichtig om 30 minuten te mengen. Incuberen bij 37°C gedurende 30 minuten met het afdichtingsplaat membraan dat het plaat afdicht.
5. Aan het einde van de incubatie, verwijderen en weggooien van de plaat dekking. Haal uit, voeg wasbuffer aan elke put voor 20 seconden. Herhaal 5 keer. Na de laatste wascyclus,Draai de plaat over op een vlekpapier of een schone handdoek, en tik er op om eventuele restjes te verwijderen.
6Bijgevoegd Conjugat 50μL (niet in de lege put toegevoegd).
7. Incuberen bij 37°C gedurende 30 minuten met het afdichtingsplaat membraan dat de plaat afdicht. Herhalen de wasstap 5 keer zoals in stap 5.
8. Substraat A (50μL) en Substraat B (50μL) worden toegevoegd (niet in de lege put toegevoegd).
9. Voeg 50μL stopoplossing toe aan elke put (niet toevoegen in de lege put).Kalibreer de platenlezer met de Blank goed en lees de absorptie bij 450nm. Als een dubbelfilterinstrument wordt gebruikt, stelt u de referentiegolflengte op 630 nm. Stel geen lege putten in als u dubbelgolflengte gebruikt om te detecteren. Bereken de cut-off waarde en evalueer de resultaten.
Bewaarplaats
• Bewaren bij 2-8°C.
• Plaats ongebruikte putten in de aluminium folie zak met rits slot en breng ze terug naar 2-8 °C, onder welke omstandigheden de putten 2 maanden stabiel blijven.of tot de op het etiket aangegeven vervaldatum, afhankelijk van welke datum eerder is.
• Verzegel en breng ongebruikte kalibratoren terug naar 2-8 °C, onder welke omstandigheden de stabiliteit 1 maand behouden blijft, voor langer gebruik, bewaar geopende kalibratoren in aliquoten en vries ze bij 20 °C.Vermijd meerdere vries-ontdooi cycli.
• Verzegel en breng alle andere ongebruikte reagentia terug naar 2-8 °C, onder welke omstandigheden de stabiliteit 2 maanden of tot de op het etiket vermelde houdbaarheidsdatum wordt bewaard, afhankelijk van welke datum eerder is.
Uw bericht moet tussen de 20-3.000 tekens bevatten!
