Antilichaam tegen het hepatitis B-virus kernantigeen (HBcAb)

ELISA TisKHet

Alleen voor in vitro-diagnostiek en professioneel gebruik.

NAAM VAN HET PRODUCT

Anti-HBc ELISA-testkit (serum/plasma)

GEBRUIK

Deze anti-HBc ELISA Test Kit is een kwalitatieve detectie van antilichamen tegen het hepatitis B virus kernantigeen (HBcAb) in menselijk serum/plasma.Het reagens is geschikt voor klinische screening en diagnose van hepatitis B-virusinfectie in menselijk serum/plasma.

TESTPRINCIPEL

Het hepatitis B-virus (HBV) is een envelop.een dubbelstrengig DNA-virus dat tot de familie Hepadnaviridae behoort en bekend staat als de belangrijkste oorzaak van bloedoverdraagbare hepatitis samen met het hepatitis C-virus (HCV)Infectie met HBV veroorzaakt een spectrum aan klinische manifestaties, variërend van milde, onopvallende ziekte tot fulminerende hepatitis, ernstige chronische leverziekten,die in sommige gevallen tot levercirrose en levercarcinoom kan leidenDe classificatie van een hepatitis B-infectie vereist de identificatie van verschillende serologische markers die tijdens de drie fasen (incubatie, acute en herstellende) van de infectie worden uitgedrukt.

Het belangrijkste bestanddeel van het virus is het hepatitis B-kernantigeen (HBcAg).Dit kernantigeen bestaat uit een enkel polypeptide van ongeveer 17 kD dat wordt vrijgegeven bij de ontbinding van de kerndeeltjes.Ten minste één immunologische determinant is aanwezig in het antigeen.

Kort na het begin van HBsAg verschijnen antilichamen tegen HBcAg (anti-HBc totaal antilichaam en IgM) en verdwijnen nooit.een hepatitis B-infectie kan worden opgelopen zonder immunologisch detecteerbare anti-HBcHet onderzoek naar anti-HBc geeft gegevens over de prevalentie van hepatitis B in verschillende bevolkingsgroepen.chronischDe identificatie van anti-HBc is van vitaal belang bij de diagnose in een klinische setting.de anti-HBc-marker maakt een correcte diagnose en een goede monitoring van de progressie van het virus mogelijkAnti-HBc kan mogelijk de enige indicator zijn van een hepatitis B-infectie (inclusief andere tests van HBsAg-negatieve patiënten).

Het systeem van de HBcAb-ELISA-test is gebaseerd op het solide fase, eenstaps-incubatie competitieve principe.het concurreert met monoklonale anti-HBc geconjugeerd met pepersperoxidase (HRP-Conjugate) voor een vaste hoeveelheid zuiverde HBcAg die vooraf in de microplate is gecoatAls er geen anti-HBc aanwezig is, wordt het HRP-conjugated anti-HBc met antigenen in de putten gebonden.Na de toevoeging van chromogeenoplossingen A en B in de putten en tijdens de incubatieDe reactie met zwavelzuur wordt gestopt en de blauwe kleur wordt geel.of helemaal geen kleur.

VANSTELVRAAGEN

1.Specimenverzameling:Er is geen speciale voorbereiding van de patiënt vereist. Het monster wordt volgens de normale laboratoriumpraktijk verzameld.Het bloed dat via venepunctie is verzameld, moet natuurlijk en volledig kunnen stollen. ¢ Het serum moet zo vroeg mogelijk van het bloedstollingspunt worden gescheiden om hemolyse van de RBC te voorkomen.Er dient voor te worden gezorgd dat de serum/plasma-monsters helder zijn en niet besmet zijn met micro-organismen.

2.HLipaemische, jactère- of hemolytische proefpersonen mogen niet worden behandeld. gebruiktHet is mogelijk dat de test niet klopt.Niet activeren door warmte exemplarenDit kan leiden tot verslechtering van het doel-analyte.

3. HBcAb ELISA is alleen bedoeld voor het testen van individuele serum/plasma monsters.

4Vervoer en opslag: bewaren bij 2-8°C. Specimens die niet binnen 3 dagen moeten worden onderzocht, bewaren bevroren (-20°C of lager).Voor verzending, moeten de monsters worden verpakt en geëtiketteerd in overeenstemming met de bestaande lokale en internationale voorschriften voor het vervoer van klinische monsters en etologische agentia.

Testprocedure

1Alle reagentia moeten 15 minuten voor gebruik op kamertemperatuur worden gelaten.

2. Verdun de wasbuffer met gedistilleerd water met een verdunningsfrequentie van 1:40 voor gebruik.

3Het monster moet overeenkomen met het aantal microplaten, elk plaatje moet voorzien zijn van negatieve controle 3 putten, positieve controle 2 putten en lege controle 1 put.(Als detecteren met dubbele golflengte detectie, is het niet toegestaan om geen lege controleput in te stellen).

Opmerking: Gebruik voor elk monster, negatieve en positieve controle, een afzonderlijke pipetspits om kruisbesmetting te voorkomen.

4. Voeg 50 μL monster in de overeenkomstige put toe (Wanneer deze kit wordt gebruikt voor klinische hulpdiagnoses, moet het te testen monster om 1:30 uur met normale zoutoplossing worden verdund voor de test.Wanneer het wordt gebruikt voor epidemiologisch onderzoek, kan het oorspronkelijke monster worden gedetecteerd ), wordt 50 μL negatieve controle en positieve controle toegevoegd aan negatieve controleputten en positieve controleputten.Het toevoegen van respectievelijk enzymconjugat 50μL (niet toevoegen in de lege put).

5. Schud gedurende 30 seconden met een oscillator (deze stap is zeer belangrijk).

6. Aan het einde van de incubatie, verwijderen en weggooien van de plaat dekking. Haal uit, voeg wasbuffer aan elke put voor 20 seconden. Herhaal 5 keer. Na de laatste wascyclus,Draai de plaat over op een vlekpapier of een schone handdoek, en tik er op om eventuele restjes te verwijderen.

7. Voeg Substraat A (50μL) en Substraat B (50μL) toe (niet in de lege put toevoegen). Meng voorzichtig door te schudden. Incuberen bij 37 °C gedurende 15 minuten met het afdichtingsplaat membraan dat de plaat afdicht.

8. Voeg 50μL stopoplossing toe aan elke put (niet toevoegen in de lege put).Kalibreer de platenlezer met de Blank goed en lees de absorptie bij 450nm.Als een dubbelfilterinstrument wordt gebruikt, wordt de referentiegolflengte ingesteld op 630 nm. Geen lege putten worden ingesteld als twee golflengten worden gebruikt om te detecteren. Bereken de cut-off waarde en evalueer de resultaten.