BIOVANTION de Testuitrusting van Tg Ab van de antithyroglobulin Antilichamentest Anti

De TEST KIT Thyroglobulin Ab van anti-Tg ELISA

1. Bestemming

Immunoassay voor de kwantitatieve bepaling in vitro van antilichamen aan thyroglobulin in menselijk serum. De antibepaling van ‐ wordt Tg gebruikt als hulp in de opsporing van auto-immune schildklierziekten.

2. Samenvatting

Thyroglobulin (Tg) wordt geproduceerd in de schildklier en is een belangrijkst onderdeel in het lumen van de schildklierfollikel. In synergisme met de enzym‐ schildklier-specifieke peroxidase (TPO), heeft Tg een essentiële functie in iodination van de tyrosine van L ‐ en in de vorming van de schildklierhormonen T4 en T3. Zowel zijn Tg als TPO potentieel autoantigenic.

De opgeheven serumconcentraties van antilichamen tegen Tg (autoantibodies van Tg ‐) worden gevonden bij onderwerpen met autos-immuniteit‐ gebaseerd thyreoditis. De hoge concentraties van anti‐ Tg samen met anti‐ TPO zijn indicatief van chronisch lymphocytic doordringend thyreoditis ‐ (de ziekte van Hashimoto). De frequentie van thyroglobulin antilichamen is ongeveer 70 ‐ 80% bij onderwerpen met auto-immuun thyreoditis ‐, met inbegrip van de ziekte van Hashimoto, en ongeveer 30% in individuen met de ziekte van Graven. De antianalyse van ‐ Tg is belangrijk voor gebruik in de controle van de cursus van het thyreoditis van Hashimoto en voor de differentiële diagnose (gevallen van verondersteld auto-immuun thyreoditis van onbekende oorsprong met negatieve anti de testresultaten van ‐ TPO, de ziekte van Graven zonder lymphocytic infiltratie, en aan regel uit interferentie door Tg ‐ autoantibodies in de Tg-test).

Hoewel de gevoeligheid van de procedure kan worden verhoogd door extra schildklierantilichamen (anti de receptor‐ antilichamen van ‐ TPO, van TSH ‐) gelijktijdig te bepalen, sluit een negatief resultaat definitief niet de aanwezigheid van een auto-immune ziekte uit. Het niveau van de antilichamentiter correleert niet met de klinische activiteit van de ziekte. De titers die aanvankelijk opgeheven zijn kunnen negatief worden als de ziekte voor een langere periode of als voortduurt

de vermindering komt voor. Als de antilichamen na vermindering weer verschijnen, is een instorting waarschijnlijk.

Het Enzym verbond immunosorbent het antigeen en het konijn antihuman antilichamen van IgG van het analysesgebruik de menselijke (met elkaar anti-IgG).

3.Reagents verstrekte materialen

• Met een laag bedekte Microplate, 8 X12-stroken, 96 putten. Pre-coated met menselijk TG-antigeen.

• Kalibermeters, 6 flesjes, 1 ml elk, klaar te gebruiken; Concentraties: 0 (A), 50 (B), 150 (C), 500 (D), 1000 (E) EN 2000 (F) IU/ML.

• De enzymstamverwant, 1 flesje, 11,0 ml van HRP (mierikswortelperoxidase) etiketteerde konijn anti menselijke IgG-antilichamen (anti-IgG) in buffer tris-NaCl die BSA bevatten (runderserumalbumine). Bevat 0,1% ProClin300-bewaarmiddel.

• Serumverdunner: 1 flesje, 11mL. Het bevatten van bufferzouten en een kleurstof

• Het Concentraat van de wasoplossing, 1 flesje, 25 ml (geconcentreerde 40X), PBS-Tween wasoplossing.

• Substraat, 1 flesje, 11ml, klaar te gebruiken, (tetramethylbenzidine) TMB.

• Eindeoplossing, 1 flesje, 6,0 ml 1 mol/l-zwavelzuur.

• IFU, 1 exemplaar.

• Plaatdeksel: 2 stukken.

4. Vereiste materialen (maar verstrekt niet)

• Microplatelezer met de golflengte absorberend vermogen van 450nm en 620nm-.
• Microplatewasmachine.
• Incubator.
• Plaatschudbeker.
• Micropipettes en micropipettes die met meerdere kanalen 50µl met een precisie leveren van dan beter 1,5%.
• Absorberend document.
• Gedistilleerd water

5. Testprocedure

• Het gebruik slechts het aantal putten vereiste en formatteert de microplateputten voor elke te analyseren kalibermeter en steekproef.

• Voeg 100 µL goed van kalibermeters aan elk toe.

• Voeg 100 µL van Steekproefverdunner (Groene kleur) goed aan elk behalve de kalibermeter-Putten toe.

• Voeg 10 µL goed toe van Steekproef aan elke Steekproefverdunner (NOTA: De reagentia in Putten zullen Blauwe kleur van Groen), dan schok 30 seconden draaien.

• Behandel de plaat met een plaatdeksel en broed bij 37 °C 30 minuten uit.

• Verwerp de inhoud van de micro- plaat door klaring of aspiratie. Als het overhevelen, onttrek en bevlek de plaat droog met absorberend document.

• Voeg 350 µL van wasoplossing toe, hevel (kraan en vlek) over of zuig op. Herhaal 4 extra tijden voor een totaal van 5 wassen. Aan het eind van was, keer de plaat om en onttrek uit om het even welke overblijvende wasoplossing op absorberend document.

• Voeg 100 µL van enzymstamverwant toe,

• Behandel de plaat met een plaatdeksel en broed bij 37 °C 30 minuten uit

• Voeg 350 µL van wasoplossing toe, hevel (kraan en vlek) over of zuig op. Herhaal 4 extra tijden voor een totaal van 5 wassen. Aan het eind van was, keer de plaat om en onttrek uit om het even welke overblijvende wasoplossing op absorberend document.

• Voeg 100 µL goed van Substraat aan elk toe. Behandel en broed bij omgevingstemperatuur (18-25℃) in dark voor reactie uit 10 minuten. Schud niet de plaat na substaattoevoeging.

• Voeg 50 µL goed van eindeoplossing aan elk toe.

• Schok 15-20 seconden om de vloeistof binnen de putten te mengen. Het is belangrijk om ervoor te zorgen dat de blauwe kleur volledig in geel verandert.

• Lees de absorbering goed van elk bij 450 NM die (620 tot 630 NM gebruiken als verwijzingsgolflengte om onvolmaaktheden goed te minimaliseren) in een micro- plaatlezer. De resultaten zouden binnen 30 minuten moeten worden gelezen na het toevoegen van de eindeoplossing.