Ebv-VCA het Specimen van IgA Ab Test ELISA Kit Enzyme Immunoassay Test Plasma

Ebv-VCA IgA Ab ELISA Kit Catalog No.: BE501A
Enzymimmunoassay voor de opsporing van IgA-antilichaam aan het virale capsidantigeen (VCA) van Virus epstein-Barr (EBV).
 
1. PRINCIPE VAN DE ANALYSE
Ebv-VCA IgA Ab ELISA Kit gebruikt een opsporingssysteem waar microplate de putten met recombinant antigeen die aan een hoogst antigenic segment ebv-VCA beantwoorden met een laag bedekt zijn. Serum of plasma de specimens, controles worden toegevoegd aan de putten. Tijdens incubatie, IgA-zullen de antilichamen specifiek voor ebv-VCA huidig in het specimen aan het recombinante antigeen vast op de microplateputten binden. De putten worden gewassen om unbound materialen te verwijderen, en de anti-menselijke IgA-peroxidasestamverwant zal aan het complexe antigeen-antilichaam binden en de bovenmatige unbound enzymstamverwanten worden opnieuw verwijderd door was. Het enzymsubstraat, tetramethylbenzidine (TMB) wordt, toegevoegd op incubatie het substraat door het verbindende enzym zal worden gehydroliseerd en een blauwe of blauwgroene kleur ontwikkelt zich in putten die de antilichamen van ebv-VCA bevatten IgA. De enzymreactie wordt tegengehouden door de toevoeging van zwavelzuur. De ontwikkelde intensiteit van kleur wordt gelezen spectrofotometrisch bij 450nm (450 nm/630 NM) en is evenredig aan de hoeveelheid antilichamen huidig in het specimen.
REAGENTIA
 
2. Materialen van de uitrustingen worden voorzien die:

 
3. ANALYSEprocedure

1. Breng ELISA Kit (alle reagentia), en Specimens v3o3or gebruik aan kamertemperatuur (ongeveer 30 minuten).
2. Het verdunde geconcentreerde 1:19 van de wasbuffer met ddH2O. Bijvoorbeeld, zouden 5 ml van het concentraat van de wasbuffer aan een totaal volume van 100 ml met gedeioniseerd of gedistilleerd water moeten worden verdund.
3. Voor elke test, plaats goed één spatie als achtergrondcontrole, twee positieve en drie negatieve controles. Deel de positieve controle van 100ml en negatief controleduplicaat in individuele putten uit. Noch zouden de steekproeven noch de HRP-Stamverwant in de Spatie goed moeten worden toegevoegd.
4. Verdeel100ml van Steekproefverdunning in individuele testputten behalve de controles.
5. Voeg 10ml van elke teststeekproef in de testputten toe; te mengen draaikolk zich.
6. Broed 30 minuten uit bij 37°C
7. Was elk goed 5 keer door krachtig goed het vullen van elk met verdunde wasbuffer, dan de plaat om te keren om al water weg te gaan en de rand van putten op absorberend document gedurende enkele seconden te blokkeren.
8. Voeg 100ml goed van Enzymstamverwant aan elk toe. Meng het zacht door de microtiter plaat op vlakke bank te wervelen voor minuten 1. Voeg goed Enzym geen Stamverwant aan de spatie toe.
9. Broed 20 minuten uit bij 37°C
10. Was de plaat 5 keer als stap 7.
11. Voeg één daling (50ml) van Substraatoplossing A (HRP-Substraat) goed aan elk toe, dan voeg één daling (50ml) van Substraatoplossing B (TMB) goed aan elk toe. Meng me zacht en broed bij 37°C uit 30 minuten.
12. Voeg één daling (50ml) goed van Eindeoplossing aan elk toe om de kleurenreactie tegen te houden. Lees de OD waarde bij 450 nm/630 NM met de dubbele lezer van de filterplaat. Het is optie om de OD waarde bij 450 NM met de enige lezer van de filterplaat te lezen. (goed gebruikend de OD waarde van de spatie om al OD lezing van alle putten te verbeteren)